猪源牛病毒性腹泻病毒SD0803株细胞传代研究

作     者：孙春清 邓宇 张宏彪 龙进学 韦祖樟 童光志 袁世山 

作者机构：中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 西昌学院动物科学学院西昌615000 南京农业大学动物医学院南京210095 

基　　金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(2010JB15) 

出 版 物：《中国动物传染病学报》 (Chinese Journal of Animal Infectious Diseases)

年 卷 期：2012年第20卷第2期

页      码：22-28页

摘      要：为研究猪源牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)生物学特性,将本实验室分离得到的SD0803毒株在马-达氏牛肾细胞(mardin-darby bovine kidney,MDBK)上连续传40代,提取第40代病毒基因组RNA,设计扩增及测序引物,用RT-PCR方法分5段扩增第40代病毒基因片段,并进行全长测序,利用DNASTAR软件进行序列拼接及分析,与亲代病毒SD0803序列比对分析;用Real-time PCR方法测定第1、10、20、30和40代细胞上清中的病毒复制效率,并绘制多步生长曲线。测序结果表明,第40代病毒与亲代病毒核苷酸序列的同源性为99.8%,氨基酸序列的同源性为99.6%,其中有23处发生核苷酸突变,14处为有义突变,氨基酸变化主要集中在E2和NS5B区域。多步生长曲线显示,传代病毒和亲本病毒均能在MDBK细胞上获得较高的复制效率,并有着相似的生长特性,复制效率基本一致。本次研究为研制猪源BVDV疫苗做好了物质储备,为下一步研究其致病性和抗原性奠定基础。

主 题 词：牛病毒性腹泻病毒 病毒传代 全长测序 Real-timePCR 多步生长曲线 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1674-6422.2012.02.004

馆 藏 号：203312217...