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额外的错配碱基提高T4 DNA连接酶等位特异性连接(英文)

额外的错配碱基提高T4 DNA连接酶等位特异性连接(英文)

作     者:李书亚 郜艳敏 胡亚赛 郝敏 齐浩 LI Shu-Ya;GAO Yan-Min;HU Ya-Sai;HAO Min;QI Hao

作者机构:天津大学化工学院 系统生物工程教育部重点实验室天津大学天津300072 

基  金:国家自然科学基金项目(No.21476167和No.21778039)资助 

出 版 物:《中国生物化学与分子生物学报》 (Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology)

年 卷 期:2018年第34卷第8期

页      码:854-860页

摘      要:连接是一种主要的DNA处理过程。由于较低的商业成本以及核酸底物识别的灵活性,T4DNA连接酶被广泛应用于生物分子工程,特别是特定核酸序列的等位特异性连接检测。本文评估了在T4 DNA连接酶介导的连接反应中,引入额外的错配碱基对所产生的影响。设计了超过150组DNA/DNA或DNA/RNA带有的额外错配碱基对的组合。结果发现,引入额外的错配碱基对后,T4 DNA连接酶在DNA/DNA连接中特异性可提高60倍以上,而在DNA/RNA连接中特异性只能提高2倍。在等位特异性连接中,有的错配碱基对可使T4 DNA连接酶的特异性提高600多倍。

主 题 词:等位特异性连接 错配 T4 DNA连接酶 锁式探针 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 071010[071010] 07[理学] 

核心收录:

D O I:10.13865/j.cnki.cjbmb.2018.08.08

馆 藏 号:203312582...

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