玉蜀黍黑粉菌环介导等温扩增检测体系的建立及应用

作     者：段丽萍 曹言勇 李会勇 陈洵 石磊 DUAN Li-ping;CAO Yan-yong;LI Hui-yong;CHEN Xun;SHI Lei

作者机构：暨南大学食品安全与营养研究院广州510632 河南省农业科学院粮食作物研究所郑州450002 

基　　金：国家重点研发计划项目(2016YFD0500600) 河南省重点科技攻关项目(162102110003) 

出 版 物：《植物病理学报》 (Acta Phytopathologica Sinica)

年 卷 期：2018年第48卷第4期

页      码：482-491页

摘      要：本文根据玉蜀黍黑粉菌(Ustilago maydis)的Um Pep1、UmPit2和UmSee1基因各设计4套环介导等温扩增(LAMP)引物,从中筛选出1套引物对LAMP反应体系进行3因素(Bst DNA聚合酶浓度、Mg2+浓度、内外引物浓度比)3水平的优化试验。并对优化的*** LAMP反应体系进行特异性、灵敏度及田间检测可行性试验。特异性试验表明,该方法能特异性检测***,而与其他病原菌的DNA没有交叉反应;灵敏度试验表明,该反应体系的最低检出限为44 fg·μL-1p Easy-Pep质粒DNA,制作的标准曲线可对***进行定量分析。该方法也适用于在***侵染前或侵染早期对田间样品进行检测,对现场采集的172份田间样品进行检测,其中140个样品显示为阳性。本研究所建立的LAMP体系具有特异性好、灵敏度高、重复性好的特点,并能在45 min内完成对田间样品的检测,是快速、定量检测***的有效手段。

主 题 词：玉蜀黍黑粉菌 环介导等温扩增(LAMP) qPCR 

学科分类：09[农学] 0904[农学-动物医学类] 090401[090401] 

核心收录：

D　O　I：10.13926/j.cnki.apps.000179

馆 藏 号：203315647...