人生长激素的酵母/哺乳动物穿梭载体的构建

作     者：汪宗桂 郑文岭 马文丽 梁念慈 

作者机构：广东医学院生化教研室广东湛江524023 华南基因组研究中心广州510800 南方医科大学基因工程研究所广州510515 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(编号:39880044) 

出 版 物：《广东医学》 (Guangdong Medical Journal)

年 卷 期：2005年第26卷第11期

页      码：1473-1475页

摘      要：目的酿酒酵母已被证实可作为载体应用于口服基因治疗及免疫中。为研究人生长激素(HGH)以酿酒酵母作为运送载体的口服基因药物,需要构建一种能够在酵母中复制而在哺乳动物细胞表达的HGH穿梭载体。方法利用ECHO克隆系统先构建出HGH的哺乳动物表达载体,使HGH处于CMV启动子的调控下;然后设计引物扩增CMV-HGH片段,连接到酿酒酵母表达载体pESC-URA中,构建HGH的酵母/哺乳动物穿梭载体。结果经EcoRI单酶切、EcoRI/SpeI双酶切、菌落PCR以及序列测定鉴定,确认所构建的确为酵母/哺乳动物穿梭载体pESC-CMV-HGH。结论成功构建的穿梭载体可在酿酒酵母中复制,在哺乳动物中受CMV启动子的调控进行表达,为HGH的口服基因药物研制打下了基础。

主 题 词：酿酒酵母 穿梭载体 哺乳动物 人生长激素 口服基因治疗 动物细胞表达 酵母表达载体 HGH 基因药物 ECHO 引物扩增 序列测定 药物研制 启动子 CMV PCR 复制 调控 酶切 

学科分类：0831[工学-公安技术类] 1001[医学-基础医学] 08[工学] 100102[100102] 10[医学] 

D　O　I：10.13820/j.cnki.gdyx.2005.11.012

馆 藏 号：203316497...