牛传染性鼻气管炎病毒LUX^(TM)新型荧光PCR检测方法的建立

作     者：陈茹 毕英佐 曹永长 林志雄 赵吟 罗琼 朱道中 CHEN Ru;BI Ying-zuo;CAO Yong-chang;LIN Zhi-xiong;ZHAO Yin;LUO Qiong;ZHU Dao-zhong

作者机构：广东出入境检验检疫局广东广州510623 华南农业大学动物科学院广东广州510642 

基　　金：国家质检总局2006年科研项目 广东出入境检验检疫局科研项目2004GDK36 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2007年第29卷第4期

页      码：303-307页

摘      要：本研究针对牛传染性鼻气管炎病毒(Infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)高度保守的gC基因设计单标记并具有自身荧光淬灭功能的LUX^(TM)引物,建立LUX^(TM)新型实时荧光PCR方法用于快速检测IBRV。该方法对四株IBRV细胞培养物的检测均呈典型阳性反应,而对其它动物疱疹病毒以及健康牛组织DNA和细胞对照的检测结果为阴性,检测时间包括核酸提取仅需1h～2h。试验表明,LUX^(TM)荧光PCR法对IBRV细胞增殖病毒液的检测敏感性可达0.04 TCID_(50),比病毒分离敏感性至少提高10倍;对10倍系列稀释的纯化IBRV核酸样品,LUX^(TM)荧光PCR的检测敏感性比常规PCR可提高10~3倍。将病毒液添加到健康牛精液和血液样品中,该荧光PCR可检测到牛冻存精液中40 TCID_(50)、牛抗凝全血、血清和临床精液中0.04 TCID_(50)的病毒,说明对临床样品的检测有效。本研究所建立的LUX^(TM)荧光PCR方法快速敏感,适合应用于活牛及其遗传物质的进出口检疫、养牛业疾病防控等领域对IBRV的快速检测。

主 题 词：牛传染性鼻气管炎病毒 LUX^TM引物 实时荧光PCR 牛疱疹病毒1型 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-0589.2007.04.014

馆 藏 号：203316933...