微小牛蜱Bm86基因的克隆与原核表达

作     者：樊瑞泉 罗建勋 杨孝朴 殷宏 高金亮 关贵全 刘志杰 党志胜 马米玲 任巧云 刘爱红 FAN Rui-quan;LUO Jian-xun;YANG Xiao-pu;YIN Hong;GAO Jin-liang;GUAN Gui-quan;LIU Zhi-jie;DANG Zhi-sheng;MA Mi-ling;REN Qiao-yun;LIU Ai-hong

作者机构：中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 

基　　金：国家高新技术研究发展计划(863)项目(2006AA10A207) 国家自然科学基金资助项目(30270992) 

出 版 物：《甘肃农业大学学报》 (Journal of Gansu Agricultural University)

年 卷 期：2007年第42卷第1期

页      码：15-19页

摘      要：根据已发表的Bm86基因序列,设计表达型引物,利用RT-PCR技术,从微小牛蜱饥饿幼蜱的研磨物中扩增Bm86基因,将PCR产物连入pGEM-T Easy载体,构建重组克隆载体pGEM-T easy-Bm86.测序分析表明:克隆的微小牛蜱Bm86基因序列与GenBank上登录的Bm86基因的核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为97%和95.6%.然后对重组克隆载体pGEM-T easy-Bm86进行双酶切,获得带有粘性末端的Bm86基因片段,并将此片段定向亚克隆入原核表达载体pGEX-4T-1,构建重组原核表达载体pGEX-4T-1-Bm86,将其转化到BL21宿主菌中,用IPTG进行诱导表达.SDS-PAGE检测表明表达产物为分子量为88 Ku的融合蛋白,目的蛋白约占蛋白总量的39%,表达量约为1.08 mg/*** blot分析表明此表达产物能被兔抗微小牛蜱阳性血清所识别.

主 题 词：微小牛蜱 Bm86基因 克隆 表达 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1003-4315.2007.01.004

馆 藏 号：203317033...