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ErbB2 RNA干扰联合^(60)Co γ照射对U251细胞增殖及凋亡的影响

ErbB2 RNA干扰联合^(60)Co γ照射对U251细胞增殖及凋亡的影响

作     者:高玲 李峰生 陈肖华 董波 张军权 饶亚岚 丛悦 毛秉智 GAO Ling;LI Fengsheng;CHEN Xiaohua;DONG Bo;ZHANG Junquan;RAO Yalan;CONG Yue;MAO Bingzhi

作者机构:军事医学科学院放射与辐射医学研究所放射病实验治疗实验室北京100850 

基  金:国家自然科学基金项目(30770640)资助 

出 版 物:《辐射研究与辐射工艺学报》 (Journal of Radiation Research and Radiation Processing)

年 卷 期:2007年第25卷第5期

页      码:302-307页

摘      要:构建特异性抑制白血病病毒致癌基因同源体2(ErbB2)的小干扰RNA(siRNA)表达载体,并检测联合^(60)Coγ照射对U251细胞增殖抑制及促进凋亡作用。设计、合成ErbB2特异性的19bp短链寡核苷酸,经退火形成双链DNA片段,克隆到Psflence2.1-U6-H1载体中,构建ErbB2特异siRNA的表达载体,HindⅢ和BamHI双酶切及测序鉴定重组体,并转染U251细胞,四甲基偶氮唑盐法(Methylthiazolyl tetrazolium assay,MTT)检测细胞增殖活性,Hoechst 33258染色,Annexin-(?)检测细胞凋亡情况。经双酶切与测序鉴定成功构建ErbB2-siRNA表达载体,转染星型胶质瘤细胞株U251细胞可显著抑制细胞增殖活性(p<0.05),并诱导细胞产生时间依赖性凋亡,24h凋亡细胞百分比增加10.52%,48h凋亡细胞百分比增加50.65%。联合^(60)Coγ照射U251细胞增殖活性较单独转染进一步显著降低(p<0.05)。运用Psilence2.1-U6-H1载体构建的ErbB2-siRNA表达载体可有效抑制U251细胞增殖并促进时间依赖性细胞凋亡;联合^(60)Coγ照射可增加增殖抑制效果。

主 题 词:小干扰RNA 白血病病毒致癌基因同源体2 U251细胞 

学科分类:1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D O I:10.11889/j.1000-3436.2007-0066

馆 藏 号:203317076...

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