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昆明鼠胚胎干细胞系的建立及其特性(英文)

昆明鼠胚胎干细胞系的建立及其特性(英文)

作     者:谢安 汪泱 娄远蕾 张立行 冯年花 Xie An;Wang Yang;Lou Yuan-lei;Zhang Li-xing;Feng Nian-hua

作者机构:南昌大学第一附属医院泌尿外科研究所江西省南昌市330006 

基  金:the Natural Science Foundation of Jiangxi Province No.2007GZY1470 

出 版 物:《中国组织工程研究与临床康复》 (Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research)

年 卷 期:2009年第13卷第45期

页      码:8992-8996页

摘      要:背景:到目前为止,国际上通用的动物胚胎干细胞细胞系大多是从129品系和C57BL/6系小鼠中获得的,少部分来自BALB/C系,来自于中国昆明鼠则鲜有报道。目的:分离培养昆明系小鼠胚胎干细胞,并对其生物学特性进行初步鉴定。设计、时间及地点:以细胞为对象的观察性实验,于2006-05/2007-06在南昌大学第一附属医院泌尿外科研究所完成。材料:昆明小鼠3.5d胚龄的囊胚。方法:自昆明系小鼠3.5d胚龄的囊胚分离内细胞团细胞,接种于小鼠原代胚胎成纤维细胞饲养层上,对分离的内细胞团细胞进行扩增、传代培养。主要观察指标:观察胚胎干细胞集落的生长情况,对其碱性磷酸酶表达进行染色分析,采用免疫荧光法检测其阶段特异性胚胎抗原1表达,以反转录-聚合酶链反应检测其特异性表达因子c-Myc,Nanog,Oct3/4和Sox2的基因表达情况,并对其体内外分化能力对进行鉴定分析。结果:分离、培养自内细胞团的细胞呈典型的胚胎干细胞集落样生长,碱性磷酸酶染色及阶段特异性胚胎抗原1荧光染色阳性,细胞表达c-Myc,Nanog,Oct3/4和Sox2等基因,细胞在体内外均能分化成来源于不同胚层的多种细胞类型。结论:成功从昆明小鼠囊胚中分离并建立一株胚胎干细胞系,其生物学特性与其他胚胎干细胞株相符。

主 题 词:胚胎干细胞 昆明小鼠 细胞培养 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 071007[071007] 

D O I:10.3969/j.issn.1673-8225.2009.45.037

馆 藏 号:203317955...

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