应用real-time PCR定量检测小麦条锈菌潜伏侵染量方法的建立
作者机构：中国农业大学植物病理学系农业部植物病理学重点开放实验室北京100193 美国加州大学植物病理学系Kearney农业研究中心Parlier CA93648
基 金：“973”项目(2006CB100203) “十一五”科技支撑计划项目(2006BAD10A01 2006BAD08A01) 公益性行业科研专项(200903035 200903004) 教育部外专项目(2008P010)
出 版 物：《植物病理学报》 (Acta Phytopathologica Sinica)
年 卷 期：2010年第40卷第5期
页 码：504-510页
摘 要：小麦条锈病是我国小麦主要病害之一。快速、及时地诊断与定量监测处于潜育状态下的病叶,对准确估计越冬、越夏后的病情,制定正确的防治方案具有重要的意义。根据小麦条锈菌Puccinia striiformis的β-tubilin基因序列设计对该病原菌的种具有特异性的引物betaf/betar,并分别在普通PCR和real-time PCR扩增时对该引物的特异性和灵敏性进行了测定。结果表明该引物对小麦条锈菌特异性高,可稳定扩增出243 bp的目标条带。Real-time PCR的灵敏度为普通PCR的100倍。应用此特异性引物,建立了real-time PCR测定系统,定量测定了条锈菌在小麦叶片接种后组织内的DNA随时间的变化。结果表明,在接种后12 h,可在小麦叶片内检测到条锈菌,且条锈菌在小麦叶片内潜育期间随时间呈指数增长。接种第6 d后叶片内的菌量有明显的增加。建立的小麦条锈菌的real-time PCR早期定量测定方法,为及时、快速监测小麦条锈病在潜育期间的发病规律以及为该病的预测、防治提供依据。
主 题 词：小麦条锈病 潜伏侵染 real-time PCR 分子流行学
学科分类：09[农学] 0904[农学-动物医学类] 090401[090401]
核心收录：
D O I：10.13926/j.cnki.apps.2010.05.001
馆 藏 号：203318279...
