构建siRNA慢病毒载体抑制A549细胞株VEGF受体KDR基因的表达

作     者：王彤 李丹妮 李咏 王杰 WANG Tong;LI Danni;LI Yong;WANG Jie

作者机构：沈阳医学院生物化学教研室辽宁沈阳110034 

基　　金：辽宁省教育厅科研基金资助项目(2009B176) 沈阳医学院科研基金资助项目(20101020) 

出 版 物：《临床医学工程》 (Clinical Medicine & Engineering)

年 卷 期：2012年第19卷第10期

页      码：1664-1666页

摘      要：目的构建针对血管内皮生长因子(VEGF)受体KDR基因的siRNA慢病毒载体,鉴定其对肺癌细胞株A549基因干扰效果。方法设计合成针对KDR编码区的三条siRNA序列及阴性对照序列,克隆到PGCL-GFP载体,构建重组质粒,行PCR鉴定、DNA测序分析;转染人肺癌细胞株A549,Real-Time PCR及Western blot分别检测KDR mRNA、蛋白水平变化;细胞计数法绘制细胞生长曲线,流式细胞仪检测细胞周期。结果成功构建pGCL/KDR-siRNA重组质粒。A549干扰组KDR mRNA表达率下降,KDR蛋白表达量明显减少,细胞周期改变。结论构建的pGCL/KDR-siRNA表达载体可在mRNA和蛋白水平上有效抑制A549细胞株KDR基因的表达。

主 题 词：KDR RNA干扰 慢病毒 A549细胞株 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100101[100101] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1674-4659.2012.10.1664

馆 藏 号：203319280...