应用环介导等温扩增技术(LAMP)快速检测家蚕核型多角体病毒的研究

作     者：唐芬芬 杨伟克 邵榆岚 谢道燕 廖鹏飞 杨海 白兴荣 

作者机构：云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所蒙自661101 

基　　金：云南省现代农业产业技术体系建设专项(蚕桑) 云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所青年基金项目(OC2012002) 

出 版 物：《应用昆虫学报》 (Chinese Journal of Applied Entomology)

年 卷 期：2013年第50卷第4期

页      码：1013-1019页

摘      要：由家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopoyhedrosis virus,BmNPV)侵染家蚕Bombyx mori引起的家蚕核型多角体病(血液型脓病)在养蚕生产中发生较为普遍,对蚕业生产造成重大的经济损失。本研究建立了快捷有效的环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)用于快速检测BmNPV,为蚕业生产提供了一个有效检测BmNPV和进行早期诊断的技术。该方法是针对BmNPV的pe38基因的6个区段设计的6条引物用于扩增检测,整个反应在恒温条件63℃下进行25 min,扩增产物用电泳法和可视法检测(用SYBR Green I染色)。结果显示,LAMP检测方法的灵敏度是常规PCR方法的100倍,能检测的范围为21个拷贝。另外,用4.86×108OBs/mL感染4龄起蚕,提取血淋巴DNA为模板,PCR在感染36 h后检出病毒DNA,LAMP法能检测感染12h后的样品。

主 题 词：家蚕核型多角体病毒 环介导等温扩增技术 早期诊断 蚕业 

学科分类：0906[农学-水产类] 09[农学] 

核心收录：

D　O　I：10.7679/j.issn.2095-1353.2013.140

馆 藏 号：203319608...