IBV HH06株N基因原核表达及间接ELISA方法的建立

作     者：李广兴 王新 潘龙 杜威威 黄小丹 孙刚 杨贵君 任晓峰 LI Guangxing;WANG Xin;PAN Long;DU Weiwei;HUANG Xiaodan;SUN Gang;YANG Guijun;REN Xiaofeng

作者机构：东北农业大学动物医学学院哈尔滨150030 黑龙江职业学院哈尔滨150080 黑龙江省动物卫生监督所哈尔滨150090 

基　　金：国家自然科学基金项目(31172295 31272569) 

出 版 物：《东北农业大学学报》 (Journal of Northeast Agricultural University)

年 卷 期：2014年第45卷第5期

页      码：75-82页

摘      要：鸡传染性支气管炎(Avian infectious bronchitis,IB)是由传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)引起的一种急性、高度接触性传染病。试验根据NCBI发表的IBV基因序列设计引物,利用RT-PCR方法扩增病毒的N基因,并将其导入pET-30a(+)载体中,构建原核表达质粒。SDS-PAGE及Western-blot检测结果表明,重组蛋白得到表达并能与IBV阳性血清有很好的反应性。以纯化后的重组蛋白作为包被抗原,在包被量为2.5μg·mL-1、血清1??40倍稀释条件下,建立并优化间接ELISA检测方法。临床样品检测表明,该方法可高效检测出IBV抗体,并与IBV病毒作为包被抗原ELISA检测结果一致,为IB的快速诊断及流行病学研究奠定基础。

主 题 词：鸡传染性支气管炎病毒 N基因 原核表达 间接ELISA 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1002[医学-临床医学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 100201[100201] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1005-9369.2014.05.013

馆 藏 号：203319952...