人Endostatin cDNA的克隆及其在HT1080细胞中的表达

作     者：卿志荣 唐爱发 蒋冬贵 郑多 夏昆 李宜雄 陈主初 夏家辉 

作者机构：中南大学中国医学遗传学国家重点实验室410078 中南大学湘雅医院普外科长沙410008 中南大学肿瘤研究所长沙410078 

基　　金：国家‘8 63’计划(2 0 0 1AA2 17181) 国家自然科学基金 (3 9980 0 18) 国家自然科学基金 (3 0 0 70 410 )资助 

出 版 物：《湖南医科大学学报》 (Bulletin of Hunan Medical University)

年 卷 期：2002年第27卷第5期

页      码：393-396页

摘      要：目的 :构建能表达人Endostatin的真核表达质粒。方法 :设计引物从成人肝cDNA文库中通过PCR扩增到EndostatincDNA ,并在 5′端融合编码人胰岛素信号肽序列 ,经测序证实后连接到真核表达载体pcDNA3.1(- )中。将携带基因的真核表达载体质粒pcDNA3.1(- ) SEND转染HT10 80细胞后用G4 18筛选获得克隆 ,采用RT PCR和West ern blot检测Endostatin的表达。结果 :测序结果表明克隆的人EndostatincDNA完全正确 ,并且在其 5′端融合编码人胰岛素信号肽序列 ;RT PCR显示转染后的HT10 80细胞可以有效地转录EndostatinmRNA ;Western blot检测到转染后的HT10 80细胞上清有相应的蛋白质 ,大小为 2 0kD左右。结论 :含有人胰岛素信号肽序列的人EndostatincDNA重组质粒pcDNA3.1(- ) SEND转染HT10 80细胞后可以有效的表达目的蛋白并能分泌到细胞外 。

主 题 词：Endostatin 血管形成抑制因子 HT1080细胞 肿瘤 表达 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:1672-7347.2002.05.001

馆 藏 号：203321065...