基于ITS2序列和特定引物区分铁皮石斛和伪品的PCR鉴别方法

作     者：娄勇军 肖小春 陈伟鸿 余意 翟旭峰 LOU Yong-jun;XIAO Xiao-chun;CHEN Wei-hong;YU Yi;ZHAI Xu-feng

作者机构：无限极(中国)有限公司广东广州510663 

出 版 物：《中医药导报》 (Guiding Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy)

年 卷 期：2018年第24卷第15期

页      码：49-52页

摘      要：目的:应用ITS2序列差异对铁皮石斛(Dendrobiumofficinale)和类似石斛品种进行归类分析,并建立快速分析鉴别特定铁皮石斛的方法。方法:提取9批石斛药材品种的DNA,采用ITS2通用引物进行PCR扩展,测序。对ITS2序列进行BLAST序列比对,Bio Edit软件进行Clustal W多重对比,针对差异序列设计特异引物,PCR扩增,通过琼脂糖电泳进行铁皮石斛特定品种的鉴别。结果:碱基序列配对BLAST未能将#1~4样品准确归类,#5~9确定为铁皮石斛(Dendrobiumofficinale)。9批样品进行ITS2序列多重对比,发现#1~4样品与#5~9样品的ITS2序列在23~49 bp位置存在显著差异,采用软件设计引物ITS2-specific R和ITS2-specific F,在退火温度为60℃PCR扩增,#5~9样品在136 bp出现条带,而#1~4在相应位置样品未见条带。结论:特定铁皮石斛品种的ITS2序列与伪品存在局部差异,能够通过PCR方法与伪品进行区分。该PCR鉴别方法将为区分特定铁皮石斛和伪品提供快速、有效的鉴别方法。

主 题 词：铁皮石斛 ITS2序列 PCR 区分 

学科分类：1008[医学-中药学类] 1006[医学-中西医结合类] 100602[100602] 10[医学] 

D　O　I：10.13862/j.cnki.cn43-1446/r.2018.15.014

馆 藏 号：203321861...