苦瓜抗白粉病SRAP标记筛选的PCR体系优化与验证

作     者：米军红 尚小红 周生茂 车江旅 黄如葵 梁任繁 文俊丽 郭元元 梁和 

作者机构：广西大学农学院南宁530005 广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室南宁530007 广西农业科学院蔬菜研究所南宁530007 广西农业科学院南宁530007 

基　　金：国家自然科学基金项目(31240060) 广西科学研究与技术开发计划项目(桂科攻10100005-6) 广西自然科学基金项目(2012GXNSFAA053061) 广西农业科学院基本科研业务专项项目(桂农科2012YT05) 广西农业科学院公益性维持费项目(桂农科2012GW04) 

出 版 物：《南方农业学报》 (Journal of Southern Agriculture)

年 卷 期：2013年第44卷第6期

页      码：898-902页

摘      要：【目的】优化苦瓜抗白粉病SRAP标记的PCR体系,为获得苦瓜抗白粉病的SRAP分子标记、加快苦瓜抗白粉病新品种的选育提供参考。【方法】采用正交设计L16(45),在已有SRAP-PCR扩增程序基础上,以苦瓜抗、感白粉病的父母本及其杂交后代基因组DNA为模板,用4对SRAP引物对模板DNA、dNTPs、Mg2+、引物、TaqDNA聚合酶等5个因素浓度进行优化组合和验证。【结果】提取的苦瓜基因组DNA纯度较好,无蛋白质、RNA等物质污染,其纯度和完整性较好。利用引物对ME9-EM11进行PCR扩增,16个不同因素组合处理在苦瓜父本MC18和母本MC1-2的基因组DNA间的扩增结果有明显差异,其中以处理3的SRAP-PCR体系(20.0μL:DNA5.0ng/μL、dNTP0.05mmol/L、Mg2+2.5mmol/L、引物0.6μmol/L、TaqDNA聚合酶0.088U/μL)获得较清晰、较多的扩增条带。用4对引物对验证优化的SRAP-PCR体系,其重复性好,不同苦瓜材料间无明显的多态性。【结论】优化的SRAP-PCR体系适用于苦瓜抗白粉病SRAP分子标记的筛选。

主 题 词：苦瓜 SRAP-PCR 体系优化 筛选 验证 

学科分类：09[农学] 0902[农学-自然保护与环境生态类] 090202[090202] 

D　O　I：10.3969/j:issn.2095-1191.2013.6.898

馆 藏 号：203325222...