含CpG和CTB的HIV多表位基因真核表达载体的构建及表达

作     者：杜寿文 任大勇 王宇航 王婧 孙丹丹 任静强 李昌 金宁一 DU Shou-wen;REN Da-yong;WANG Yu-hang;WANG Jing;SUN Dan-dan;REN Jing-qiang;LI Chang;JIN Ning-yi

作者机构：吉林大学畜牧兽医学院长春130062 军事医学科学院军事兽医研究所全军基因工程重点实验室长春130062 

基　　金：重大传染病专项(2008ZX10004-015) 军队"十一五"科技攻关项目(06G127) 吉林省高新技术产业发展项目(2010) 长春市科技特派员行动计划(09KT04) 

出 版 物：《军事医学》 (Military Medical Sciences)

年 卷 期：2011年第35卷第3期

页      码：180-183页

摘      要：目的构建含非甲基化的CpG ODN序列及霍乱毒素B亚单位(CTB)的HIV复合多表位基因的真核表达载体,并在体外进行表达。方法设计并合成含CpG ODN序列和linker序列的CTB基因引物,用PCR方法扩增CpG-CTB基因(CC),定向连接到真核表达载体pVL上,然后在CC基因下游插入HIV复合多表位基因MEGNp24,构建重组质粒pVL-CC-MEGNp24,酶切鉴定。纯化重组质粒,转染293T细胞,RT-PCR和细胞免疫染色方法分别检测CTB和p24基因的转录及表达,同时设质粒pVL及空白对照。结果构建了重组质粒pVL-CC-MEGNp24,该质粒转染293T细胞后,CTB和复合多表位基因在293T细胞中得到稳定表达。结论成功构建了含免疫佐剂的HIV复合多表位真核表达载体,为后期疫苗的研究奠定了基础。

主 题 词：CpG ODN CTB HIV多表位基因 RT-PCR 细胞免疫染色 

学科分类：1004[医学-公共卫生预防医学类] 100401[100401] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1674-9960.2011.03.005

馆 藏 号：203325649...