LAMP技术快速检测海产品副溶血弧菌的条件优化

作     者：纪懿芳 胡文忠 姜爱丽 冯可 JI Yi-fang;HU Wen-zhong;JIANG Ai-li;FENG Ke

作者机构：大连工业大学食品学院辽宁大连116034 大连民族学院生命科学学院辽宁大连116600 大连理工大学生命科学与技术学院辽宁大连116024 

基　　金：国家自然科学基金项目(31172009) 国家科技支撑计划项目(2012BAD38B05) 大连市金州新区科技计划项目(2012-A1-049) 

出 版 物：《食品工业科技》 (Science and Technology of Food Industry)

年 卷 期：2015年第36卷第20期

页      码：59-63,67页

摘      要：本研究以副溶血弧菌不耐热溶血素tlh为目标基因设计特异性引物,优化反应条件,并对特异性、灵敏度进行了验证。LAMP最佳反应条件为,外内引物浓度比为1∶8,Mg2+反应浓度为4 mmol/L,d NTPs浓度为3.5 mmol/L,温度为65℃,反应时长为1 h,只对副溶血弧菌产生扩增反应,与其余细菌不产生扩增反应,细菌基因组DNA和纯培养物的灵敏度约为5.45×101 fg/μL和140 cfu/m L,对人工污染食品样品进行检测,检出限为2.8×102 cfu/m L。该方法反应时间短、特异性强、灵敏度高。

主 题 词：副溶血弧菌 LAMP 海产品 tlh 

学科分类：08[工学] 082203[082203] 0822[工学-核工程类] 

D　O　I：10.13386/j.issn1002-0306.2015.20.003

馆 藏 号：203326462...