伤寒沙门菌fljB∶∶lacZ变异株的制备

作     者：朱超望 茅凌翔 徐顺高 黄新祥 ZHU Chao-wang;MAO Ling-xiang;XU Shun-gao;HUANG Xin-xiang

作者机构：江苏大学医学技术学院生物化学研究室江苏镇江212013 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30570088) 江苏大学高级人才科研启动项目(04JDG008) 

出 版 物：《江苏大学学报（医学版）》 (Journal of Jiangsu University：Medicine Edition)

年 卷 期：2008年第18卷第2期

页      码：93-96页

摘      要：目的:为研究伤寒沙门菌z66鞭毛抗原编码基因fljB的表达调节机制,建立该fljB基因的β-半乳糖苷酶基因(lacZ)插入变异株。方法:采用自杀质粒介导的同源重组方法进行制备。设计加接KpnⅠ和SalⅠ的特异性引物,用PCR扩增获得fljB基因的上、下游同源性DNA片段,并与用KpnⅠ和SalⅠ酶切pSV-β-半乳糖苷酶载体(pSV-β-galactosidase vector)的片段定向连接,将连接片段克隆至自杀质粒pGMB151,再通过电击法将重组质粒转入伤寒沙门菌,在含X-Gal的蔗糖平板上筛选获得同源重组的变异株。结果:经筛选获得阳性克隆,经PCR及序列分析证实,fljB基因中的763 bp被3550 bp的lacZ片段替代。结论:成功构建伤寒沙门菌flj∶∶lacZ突变株,为进一步研究fljB基因表达调节机制奠定了基础。

主 题 词：伤寒沙门菌 舻基因 β-半乳糖苷酶基因 基因融合 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100102[100102] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1671-7783.2008.02.001

馆 藏 号：203327492...