重庆地区兔腹泻病原菌分离鉴定及检测方法的建立

作     者：许国洋 沈克飞 徐登峰 付利芝 张素辉 王孝友 杨柳 XU Guoyang;SHEN Kefei;XU Dengfeng;FU Lizhi;ZHANG Suhui;WANG Xiaoyou;YANG Liu

作者机构：重庆市畜牧科学院重庆402460 

基　　金：重庆市农业发展基金(16408) 重庆市农业技术推广与服务补助资金(14461) 

出 版 物：《西北农业学报》 (Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica)

年 卷 期：2018年第27卷第8期

页      码：1097-1103页

摘      要：对重庆地区兔细菌性腹泻病原菌进行分离鉴定并建立相应检测方法,为该病的检测及防控奠定基础。通过临床诊断与细菌分离培养,对引起兔腹泻的病原菌进行分离,利用细菌通用引物扩增分离菌16S rDNA基因序列,测序分析后构建系统进化发育树。同时,依据各病原菌特异性序列设计引物,建立PCR检测方法。结果表明,共分离到4种病原菌,分子生物学鉴定为:铜绿假单胞菌、产气荚膜梭菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌;依据铜绿假单胞菌外毒素eta基因、产气荚膜梭菌a毒素基因、金黄色葡萄球菌耐热核酸酶nuc基因和大肠杆菌外膜蛋白eae基因设计特异性引物,成功建立多重PCR检测方法,可从4种病原菌基因组混合物中扩增出大小分别为1 043、324、200和609bp的目的条带,目的菌株最低检出浓度为103cfu·mL-1。对重庆地区200份临床样本进行检测,发现4种病原菌普遍存在,其中,金黄色葡萄球菌单独感染检出率高达37.6%,与大肠杆菌的混合感染检出率达28.0%。

主 题 词：兔腹泻 病原菌 分离鉴定 多重PCR 混合感染,检出率 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.7606/j.issn.1004-1389.2018.08.003

馆 藏 号：203327626...