猪流感病毒A/Swine/Inner Mongolia/547/01分离株神经氨酸酶基因的克隆及真核表达

作     者：赵朴 李海燕 杨焕良 陈化兰 于康震 卢中华 

作者机构：中国农业农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点开放实验室 河南农业大学牧医工程学院河南郑州450002 

基　　金：兽医生物技术国家重点实验开放基金项目资助 项目编号 2 0 0 2 0 4 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2005年第27卷第1期

页      码：1-4页

摘      要：根据GenBank中登录的猪流感病毒参照序列设计了扩增神经氨酸酶 (NA)基因的特异性引物。从猪流感病毒A/Swine/InnerMongolia/5 4 7/0 1(H3N2 )株感染的鸡胚液中直接提取病毒RNA ,经RT_PCR扩增后将其克隆到pMD18_T载体上 ,进行序列测定和拼接。用HindⅢ酶切后 ,亚克隆到杆状病毒转移载体pMelBacB上 ,得到重组转移载体pMelBacNA ,然后与线性化杆状病毒DNA(Bac_N_BlueTMDNA)共转染于sf9昆虫细胞。经 3轮噬斑纯化 ,提取其DNA经PCR鉴定 ,获得重组杆状病毒株。SDS_PAGE结果显示 ,目的基因已获得表达 ,Westernblot和神经氨酸酶活性检测结果显示表达产物具有良好的免疫原性和神经氨酸酶活性 。

主 题 词：猪流感病毒 神经氨酸酶 基因克隆 基因表达 流感 

学科分类：090603[090603] 090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-0589.2005.01.001

馆 藏 号：203331460...