利用环介导等温扩增技术检测西尼罗病毒

作     者：李淑华 鹿文英 曹广文 LI Shu-hua;LU Wen-ying;CAO Guang-wen

作者机构：第二军医大学基础部流行病学教研室上海200433 

基　　金：第43批中国博士后科学基金(20080431367) 军队"十一五"科技攻关计划课题基金(06G65) 上海市自然科学基金(07ZR14141)~~ 

出 版 物：《第二军医大学学报》 (Academic Journal of Second Military Medical University)

年 卷 期：2010年第31卷第6期

页      码：590-594页

摘      要：目的建立一种早期快速检测西尼罗病毒的方法。方法以人工合成西尼罗病毒基因(1021～1240,NY99)作为模板,利用环介导等温扩增技术(LAMP)原理,设计合成3套6对引物,特异性识别人工合成西尼罗病毒基因的8个位点,在恒温63℃60min条件下扩增,80℃2min终止反应,通过real-timePCR仪实时监测反应过程,最终产物经凝胶电泳观察。同时将该方法的灵敏度及特异性与常规PCR进行比较。结果 LAMP反应在20min内即可完成,最终产物经电泳观察可见大小片段不等的呈梯度扩增条带,而同为黄病毒属的登革热病毒、流行性乙型脑炎病毒及阴性对照等均无扩增。灵敏性是常规PCR的10倍,可以检测到9.23copies/μl的病毒。结论该方法具有灵敏、特异、快速、简便、成本低等优点,适合基层和现场检测使用,对西尼罗病的早期诊断和流行病学筛查具有重要意义。

主 题 词：西尼罗病毒 环介导等温扩增 聚合酶链反应 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3724/sp.j.1008.2010.00590

馆 藏 号：203333489...