磷酸丝氨酸转氨酶(serC)基因的克隆与原核表达

作     者：赵忠润 包慧芳 王宁 周亚飞 杨慧 王炜 ZHAO Zhong-run;BAO Hui-fang;WANG Ning;ZHOU Ya-fei;YANG Hui;WANG Wei

作者机构：石河子大学生命科学学院新疆石河子832000 新疆农业科学院微生物应用研究所乌鲁木齐830091 

基　　金：新疆维吾尔自治区高技术研究发展计划(200910102) 

出 版 物：《新疆农业科学》 (Xinjiang Agricultural Sciences)

年 卷 期：2010年第47卷第12期

页      码：2505-2509页

摘      要：【目的】检测磷酸丝氨酸转氨酶(serC)基因在大肠杆菌中能否高效表达。【方法】根据GenBank所公布的serC基因序列设计一对特异性引物,以*** JM109基因组为模板PCR扩增目的基因片段,将得到的目的基因定向克隆至大肠杆菌/黄色短杆菌穿梭表达载体pEC7中,构建重组表达载体并转化宿主菌***21(DE3),经IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE分析。【结果】通过PCR扩增得到约1100 bp的DNA片段,经测序后分析该基因与已发表的serC基因具有99.27%的同源性;对重组表达载体进行酶切和PCR方法鉴定正确的命名为pEC7-C;重组表达载体转化宿主菌,SDS-PAGE分析可见约41 kD与理论大小一致的目标蛋白条带。【结论】重组表达载体转化后***21中蛋白表达量比原始菌株的蛋白表达量高,证明serC基因在*** BL21(DE3)中成功表达,为进一步构建L-丝氨酸高产基因工程菌奠定了基础。

主 题 词：serC基因 pEC7 基因克隆 原核表达 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 0828[工学-建筑类] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

馆 藏 号：203333724...