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同源重组技术在拯救猪繁殖与呼吸综合征病毒中的应用

同源重组技术在拯救猪繁殖与呼吸综合征病毒中的应用

作     者:周艳 郑海红 孙志 黄婷 袁世山 

作者机构:中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 南京农业大学动物医学院预防兽医学系江苏南京210095 

基  金:国家自然科学基金青年科学基金项目(30901078) 

出 版 物:《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期:2011年第41卷第10期

页      码:995-1000页

摘      要:为探寻猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组的规律和机制,在反向遗传学技术平台基础上,设计了几对作为配体和供体的复制子质粒,相应配对后共转染Mar-c145细胞,经原代或传代培养后拯救出病毒,并对拯救病毒的序列进行了比对分析。结果显示,拯救的病毒为重组子,共含有供体和配体亲本部分序列;在配体和供体的同源序列区发生了分子间同源重组;重组区域存在着一定的随机性,分别依次在ORF1的256~318 nt区域、ORF5的13970~13992 nt、ORF6的14428~14494 nt及ORF7的15135~15161 nt区域发生了重组。本研究利用同源重组技术建立的重组体系,不仅揭示病毒重组区域具有随机性,而且也为其他RNA病毒的感染性cDNA克隆的构建提供了一种方法。

主 题 词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 反向遗传操作 复制子 共转染 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录:

D O I:10.16656/j.issn.1673-4696.2011.10.001

馆 藏 号:203334048...

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