草菇菌种退化相关分子标记的筛选

作     者：李丹青 王杰 LI Dan-qing;WANG Jie

作者机构：华南农业大学食品学院广东广州510640 

基　　金：高等学校博士学科点专项科研基金项目(20104404120011) 

出 版 物：《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 (Journal of Northwest A&F University(Natural Science Edition))

年 卷 期：2015年第43卷第8期

页      码：195-201页

摘      要：【目的】基于SRAP分子标记技术，筛选出与草菇（Volvariellavolvacea）菌丝退化性状紧密连锁的分子标记，为进一步研究目标性状基因的克隆与功能奠定基础。【方法】以草菇正常生长菌株V51（对照）与其菌丝退化菌株（VNM1～10）为材料，采用群体分离分析法分别构建2种草菇的近等基因池。利用SRAP分子标记技术，寻找两类菌株的差异片段，回收差异片段后与pMD-18T载体连接，构建重组质粒pMD-VNMDF并转化***5α感受态细胞，将筛选的阳性克隆测序。根据差异片段序列设计引物，将其转化成SCAR分子标记，并对草菇正常菌株V51及其菌丝退化菌株VNM进行扩增试验，验证该标记的真实性和可靠性。【结果】81对SRAP引物组合中有2对引物可扩增出稳定差异条带，其中引物对Me8-Em4PCR扩增出长度约300bp的差异条带（命名为VNMDF）存在于退化菌株中。对SRAP分子标记片段VNMDF回收、测序并进行序列分析发现，该片段长度为279bp，其核酸、氨基酸序列与编码26S蛋白酶体亚基的相似性分别达到81％和93％。利用SCAR特异引物对SCAR250可在菌丝退化菌株中稳定扩增出长度约250bp片段，与预期大小（279bp）一致，而在正常菌株中未扩增出此片段。【结论】获得了1条可能与草菇菌丝退化性状基因紧密连锁的SRAP分子标记，并将其成功转化为SCAR标记（sCAR250）。

主 题 词：草菇 菌种退化 SRAP SCAR 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 0902[农学-自然保护与环境生态类] 090102[090102] 090202[090202] 

核心收录：

D　O　I：10.13207/j.cnki.jnwafu.2015.08.017

馆 藏 号：203335924...