人血管内皮生长因子C基因真核表达载体的构建(英文)

作     者：刘执玉 高杰 房云海 董平 李贵宝 宋涛 

作者机构：Department of Human AnatomySchool of MedicineShandong UniversityJinan 250012China 

出 版 物：《中国现代普通外科进展》 (Chinese Journal of Current Advances in General Surgery)

年 卷 期：2002年第5卷第4期

页      码：220-224页

摘      要：目的 :VEGF C基因的真核表达载体 ,以便进一步研究VEGF C基因在淋巴管生成中的作用。方法 :根据人VEGF C的cDNA序列 ,设计合成一对 5’端分别含有EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点的特异性引物 ,运用RT RCR方法扩增人乳腺癌细胞MDA MB 2 31中的VEGF CcDNA(1 2 6kb) ;回收PCR产物 (1 2 8kb) ,并将其连接至克隆载体pUMT 18中 ,重组的pUMT 18在大肠杆菌DH5α内扩增后 ,经质粒提取、EcoRⅠ和BamHⅠ酶切 ,筛选出阳性重组子 ,并进行基因测序鉴定 ;琼脂糖凝胶电泳回收含有VEGF CcDNA全长的酶切片断 (1 2 7kb) ,然后在DNA连接酶作用下将其与真核表达载体pcDNA3 1(- )连接 ,重组质粒经EcoRⅠ和BamHⅠ酶切予以鉴定。结果 :RT PCR产物含有VEGF CcDNA ,基因测序显示重组的pUMT 18中含有正确的人VEGF CcDNA全长序列 ,重组的pcDNA3.1(- )中含有人VEGF CcDNA全长序列。结论 :VEGF C pcDNA3.1(- )。

主 题 词：血管内皮生长因子 载体蛋白质 基因表达 VEGF—C基因 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1009-9905.2002.04.009

馆 藏 号：203336444...