连接酶链反应-酶联免疫吸附试验诊断沙眼衣原体感染的初步应用

作     者：韦红 吴仕孝 余加林 伍金林 刘官信 

作者机构：重庆医科大学附属儿童医院新生儿科400014 重庆医科大学附属儿童医院分子生物学室400014 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30200300) 

出 版 物：《中华检验医学杂志》 (Chinese Journal of Laboratory Medicine)

年 卷 期：2004年第27卷第5期

页      码：295-298页

摘      要：目的 建立连接酶链反应-酶联免疫吸附试验(LCR-ELISA)检测沙眼衣原体DNA的方法,并初步应用于检测新生儿沙眼衣原体感染。方法 针对沙眼衣原体外膜蛋白基因设计4条引物,并分别在其两端标记地高辛和生物素。用此4条引物进行LCR扩增沙眼衣原体DNA。带有生物素和地高辛双标记的扩增产物以ELISA方法显色判断结果。采集328份肺炎新生儿鼻咽标本,分别对其进行培养和LCR扩增,应用ELISA检测有无沙眼衣原体感染。结果 LCR-ELISA方法可以检测出6种沙眼衣原体标准株,而对2种肺炎衣原体和其他细菌DNA无反应,显示出较强的特异性;可检测出10fg的DNA,较传统电泳法敏感10倍,且避免了溴化乙啶的污染。328份标本中,LCR-ELISA检测出68份阳性,培养仅检测出60份,两者相比差异有显著性。以扩大的金标准判断,LCR-ELISA的特异性、敏感性分别为100％和98.6％;而培养的特异性、敏感性分别为100％和、86.9％。结论LCR-ELISA是一种特异而敏感的基因扩增方法,避免了溴化乙啶污染,判断结果客观,检测方便。经临床初步应用,取得良好结果,值得进一步研究和完善。

主 题 词：连接酶链反应 酶联免疫吸附试验 诊断 沙眼衣原体感染 

学科分类：1010[医学-医学技术类] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/j:issn:1009-9158.2004.05.010

馆 藏 号：203336791...