转基因作物中2种除草剂抗性基因aad1和dmo的PCR检测方法

作     者：龙丽坤 韩月 杨丹丹 闫伟 李飞武 Li-kun LONG;Yue HAN;Dan-dan YANG;Wei YAN;Fei-wu LI

作者机构：吉林省农业科学院农业生物技术研究所吉林长春130033 哈尔滨师范大学生命科学与技术学院黑龙江哈尔滨150025 

基　　金：吉林省农业科技创新工程项目(2013) 

出 版 物：《生物安全学报》 (Journal of biosafety)

年 卷 期：2014年第23卷第4期

页      码：278-283页

摘      要：【背景】抗除草剂转基因作物是全球种植面积最大的一类转基因植物,以除草剂抗性基因作为检测靶标的分子鉴定方法的研究与应用,对转基因生物安全的检测与监测有重要意义。【方法】根据除草剂抗性基因aad1和dmo的核苷酸序列设计PCR检测引物,并进行PCR反应体系优化、方法特异性、灵敏度、再现性等方面的测试,分别建立aad1基因和dmo基因的特异性PCR检测方法。【结果】建立的PCR检测方法在56~64℃的退火温度范围内均能获得一致性结果,具有良好的稳健性。该方法可将含有aad1基因和dmo基因的转基因作物与其他转基因作物区分开,其灵敏度可分别达到20个拷贝和40个拷贝。通过将aad1基因和dmo基因的检测引物放入同一管PCR反应体系中,还能在一次PCR中同时检测这2个靶标基因,双重PCR的检测灵敏度与单一PCR一致。【结论与意义】建立的分子方法可精准检测出含有aad1基因和dmo基因的转基因作物,具有特异性强、灵敏度高的特点,为抗除草剂转基因作物的筛选检测提供了可靠的技术支撑。

主 题 词：转基因生物 除草剂抗性基因 分子检测 PCR方法 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 0828[工学-建筑类] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.2095-1787.2014.04.009

馆 藏 号：203340708...