鸭坦布苏病毒SYBR Green qPCR检测方法的建立

作     者：陈国强 李永旺 王凯民 陈雷 钱伟 朱婷 陆春华 时长军 CHEN Guoqiang;LI Yongwang;WANG Kaimin;CHEN Lei;QIAN Wei;ZHU Ting;LU Chunhua;SHI Changjun

作者机构：广东省动植物与食品进出口技术措施研究重点实验室广东广州510623 苏州出入境检验检疫局江苏苏州215021 苏州西山生物技术有限公司江苏苏州215123 江苏出入境检验检疫局江苏南京210001 

基　　金：质检总局科研项目(2016IK132) 广东省动植物与食品进出口技术措施研究重点实验室开放课题(IQTC201602) 

出 版 物：《畜牧与兽医》 (Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2018年第50卷第9期

页      码：78-81页

摘      要：通过BLAST比较已公布的鸭坦布苏病毒核酸序列,在其E基因保守区域设计了4对引物,并用鸭坦布苏病毒培养物核酸筛选出最佳的一对引物建立了SYBR Green qPCR。用构建的重组质粒建立标准曲线,扩增效率为90.5%,在2.0×10~1~2.0×10~8copies/μL范围内具有良好的线性关系,最低检测限为100拷贝/反应。该qPCR方法可以检测5个鸭坦布苏病毒分离株以及WF100活疫苗,灵敏性比文献已发表的其他3对引物高10倍;且特异性很好,不与其他常见禽类病毒交叉反应。由此表明本研究新建了一种高度灵敏和特异的鸭坦布苏病毒的SYBR Green qPCR检测方法。

主 题 词：鸭坦布苏病毒 qPCR 灵敏性 特异性 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

馆 藏 号：203341921...