改良分子信标-实时荧光PCR同时检测猪霍乱沙门菌和丙型副伤寒沙门菌

作     者：林一曼 石晓路 朱玉梅 邱亚群 李迎慧 吕东月 扈庆华 LIN Yiman;SHI Xiaolu;ZHU Yumei;Qiu Yaqun;LI Yinhui;LV Dongyue;HU Qinghua

作者机构：深圳市疾病预防和控制中心深圳518055 深圳市慢性病防治中心 

基　　金：国家科技重大专项(No.2008ZX10004-006) 

出 版 物：《卫生研究》 (Journal of Hygiene Research)

年 卷 期：2011年第40卷第4期

页      码：514-516页

摘      要：目的建立猪霍乱沙门菌和丙型副伤寒沙门菌的实时荧光PCR快速检测方法,应用于食品和食物中毒病人标本的猪霍乱沙门菌检测以及沙门菌属C群的鉴别诊断。方法根据GenBank公布的猪霍乱沙门菌和丙型副伤寒沙门菌的保守序列(CP000857.1),设计引物和改良分子信标探针,优化PCR程序和PCR成分,以11种细菌为对照,建立实时荧光PCR检测方法,并用71株常见血清型的沙门菌评价该方法的灵敏度和特异性,所建立的方法应用于70份食品样品的检测。结果该改良分子信标—荧光PCR方法的DNA最低检出限为10fg/反应体系,菌液最低检出限为20 CFU/反应体系;无交叉荧光信号产生。针对目标菌均出现特异荧光信号。对71株沙门菌属的检测,该方法的灵敏度和特异度为100%。70份食品样品用荧光PCR和传统方法检测猪霍乱沙门菌和丙型副伤寒沙门菌,结果均为阴性。该方法从菌株的核酸提取到检测仅需1.5小时,从样品处理到检测仅需1天时间。结论建立的实时PCR检测方法快速、灵敏度高、特异性强,可用于食品及食物中毒标本的猪霍乱沙门菌检测以及沙门菌属C群的鉴别诊断,保障食品安全。

主 题 词：改良分子信标 实时荧光PCR 猪霍乱沙门菌 丙型副伤寒沙门菌 

学科分类：1004[医学-公共卫生预防医学类] 1002[医学-临床医学类] 100403[100403] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.19813/j.cnki.weishengyanjiu.2011.04.033

馆 藏 号：203342141...