血清培养基辅以碱性成纤维细胞生长因子培养扩增小鼠神经干细胞(英文)

作     者：解继胜 陈维平 邝晓聪 李后文 Xie Ji-sheng;Chen Wei-ping;Kuang Xiao-cong;Li Hou-wen

作者机构：右江民族医学院组织学与胚胎学教研室广西壮族自治区百色市533000 广西医科大学组织学与胚胎学教研室广西壮族自治区南宁市530021 广西医科大学病理生理学教研室广西壮族自治区南宁市530021 

基　　金：广西科学基金资助项目(桂科自0542118) 右江民族医学院科研基金资助项目(右医院字85号)~~ 

出 版 物：《中国临床康复》 (Chinese Journal of Clinical Rehabilitation)

年 卷 期：2006年第10卷第21期

页      码：164-166,F0003页

摘      要：背景:神经干细胞是一类具有自我更新和多向分化潜能的特殊细胞,是研究神经系统的发生、发育、发展规律及其内在的分子生物学、细胞学调控机制的理想载体,在神经系统疾病及损伤的治疗中具有广阔的应用前景。探讨一套较为简便、有效和实用的神经干细胞体外培养体系是其应用的前提和基础。目的:观察血清培养基并辅以碱性成纤维细胞生长因子对小鼠神经干细胞体外培养的影响。设计:单一样本观察。单位:右江民族医学院组织学与胚胎学教研室。材料:2个月龄昆明种小白鼠5只,雌雄不拘。方法:实验于2003-06/2005-05在广西医科大学组织学与胚胎学试验室完成。①采用贴壁培养法,从成年小鼠大脑皮层分离并体外培养成年小鼠大脑皮层细胞,制成细胞悬液后将其置入DMEM/F12(1∶1)液(包括体积分数为0.15的胎牛血清,碱性成纤维细胞生长因子20μg/L,青霉素100u/mL和链霉素100u/mL)培养,获得细胞克隆。②应用免疫组织化学技术检测克隆细胞巢蛋白的表达。主要观察指标:①培养细胞形态学观察。②培养细胞苏木精-伊红染色观察结果。③神经干细胞鉴定。结果:①培养细胞形态学观察:细胞接种后,绝大多数细胞在12h内附壁,细胞变扁平,接种后第3天,细胞开始生长,细胞数量增多,接种后第5天时生长成为数10个细胞到数百个细胞克隆,到第七八天,细胞占据瓶底80%～90%。经传代后仍成黏附生长,细胞形态规则,边界清楚。②培养细胞苏木精-伊红染色观察结果:可见细胞圆形或椭圆形,胞质少呈嗜酸性,细胞核大而圆,单个居中,着色深。③神经干细胞鉴定:免疫荧光检测显示,细胞巢蛋白抗原呈阳性。结论:分离的小鼠大脑皮层细胞在血清培养基并辅以碱性成纤维细胞生长因子的培养条件下,具有很强的增殖能力,传代后表达巢蛋白,依然具有神经干细胞的特征。

主 题 词：干细胞 细胞培养 小鼠 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 0831[工学-公安技术类] 1002[医学-临床医学类] 07[理学] 071007[071007] 

D　O　I：10.3321/j.issn:1673-8225.2006.21.008

馆 藏 号：203342223...