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可视化的RT-LAMP方法检测禽白血病病毒

可视化的RT-LAMP方法检测禽白血病病毒

作     者:刘业兵 张磊 孙跃辉 毛娅卿 李俊平 宁宜宝 LIU Ye-bing;ZHANG Lei;SUN Yue-hui;MAO Ya-qing;LI Jun-ping;Ning Yi-bao

作者机构:中国兽医药品监察所北京100081 天津大学天津300072 

基  金:2010年公益性行业(农业)科研专项(201003010) 十一五国家科技支撑计划(2007BAD86B04-4) 

出 版 物:《畜牧兽医学报》 (ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA)

年 卷 期:2011年第42卷第1期

页      码:150-156页

摘      要:本研究旨在建立一种快速检测禽白血病病毒(ALV)的RT-LAMP方法。根据GenBank中ALV序列,在其保守序列区域设计了多套LAMP引物,通过LAMP Real-time Turbidimeter仪对ALV的LAMP引物、反应体系及反应进程进行监测和分析,以评价该方法的特异性和敏感性,并对加入SYBR GreenⅠ肉眼判定与仪器监测结果进行比对。结果表明:建立的RT-LAMP方法在63℃水浴中36min可对ALV核酸进行高效扩增,在反应结束后加入SYBR GreenⅠ肉眼判断结果与Real-time Turbidimeter仪检测结果一致;该方法具有很强特异性,对其它相关鸡病病原检测结果均为阴性;其检出限量为14.2pg.μL-1,显示出很高的敏感性;用建立的LAMP方法对24个样品进行检测,结果表明LAMP法与其原检测结果基本一致;本研究建立了可对ALV进行快速检测并可肉眼判定结果的可视化RT-LAMP方法,其操作简便、无需昂贵设备,适用于ALV的快速检测。

主 题 词:禽白血病病毒 环介导等温扩增技术(LAMP) 检测 

学科分类:090603[090603] 090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录:

馆 藏 号:203342325...

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