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实时荧光定量TaqMan-PCR检测鸭瘟病毒方法的建立

实时荧光定量TaqMan-PCR检测鸭瘟病毒方法的建立

作     者:索化夷 汤承 岳华 汤明 景波 韩鹏 SUO Hua-yi;TANG Cheng;YUE Hua;TANG Ming;JING Bo;HAN Peng

作者机构:西南民族大学生命科学与技术学院四川成都610041 重庆市动物卫生监督总站重庆401147 成都市动物防疫监督总站四川成都610041 

出 版 物:《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期:2006年第28卷第3期

页      码:332-335,340页

摘      要:根据GenBank中鸭瘟病毒UL6和UL7基因的序列,设计了一对特异性引物及TaqMan探针,扩增位于UL6和UL7基因第891 ̄991位长度为101bp片段。以DPV标准强株DNA为模板,建立了实时荧光定量PCR检测鸭瘟病毒的方法。该方法只能在鸭瘟病毒DNA样本中检出荧光信号,最小检出量为1.57×102copies(23.7fg);线性范围达8个数量级;平行复管检测,组内变异系数为0.84%(n=20),同一组样本(n=6)间隔30d重复检测,结果无显著性差异;对试验感染鸭肝脏和脑组织中鸭瘟病毒的检出率为100%(40/40),对临床病例的检测结果与病毒分离鉴定结果一致;从核酸提取到报告检测结果仅需3h;对鸭正常组织、鸡传染性喉气管炎病毒、鸭病毒性肝炎病毒、鸡源大肠杆菌、鸭源多杀性巴氏杆菌、鸭副伤寒沙门氏菌等非鸭瘟病毒DNA检测,不出现非特异性荧光信号。

主 题 词:鸭瘟病毒 实时荧光定量PCR TaqMan探针 

学科分类:090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录:

D O I:10.3969/j.issn.1008-0589.2006.03.021

馆 藏 号:203342809...

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