采用荧光定量PCR溶解曲线法监测人TCR alpha链CDR3谱系漂移技术的初步探讨

作     者：汤贤英 孙永苹 马锐 朱红倩 田祖国 孙万邦 姚新生 TANG Xian-Ying;SUN Yong-Ping;MA Rui;ZHU Hong-Qian;TIAN Zu-Guo;SUN Wan-Bang;YAO Xin-Sheng

作者机构：遵义医学院免疫学教研室遵义563003 贵州省人民医院血液内科贵阳563000 遵义医学院附属医院血液内科遵义563003 

基　　金：国家973前期研究专项(2008CB517310) 国家自然科学基金(30760231&30660172)资助 

出 版 物：《中国免疫学杂志》 (Chinese Journal of Immunology)

年 卷 期：2009年第25卷第8期

页      码：727-730页

摘      要：目的:初步探讨荧光定量PCR溶解曲线分析技术监测人外周血T细胞TCRalpha链CDR3谱系漂移(单/寡/多克隆增生)。方法:提取4例正常人、2例淋巴瘤型白血病患者PBMC中的总RNA,逆转录成cDNA,以32个人TCRalpha链胚系可变区基因家族(TRAV)设计上游引物,共同的TCRalpha胚系链恒定区基因家族(TRAC)设计下游引物,荧光定量PCR(FQ-PCR)扩增32个TRAV基因各家族CDR3谱系,溶解曲线法分析各家族CDR3谱系的单/寡/多克隆增生。结果:正常人外周血T细胞TCRalpha链32个家族CDR3表达频率不一致,各家族PCR产物的溶解曲线谱型图(melting curve spectratyping)呈现熔点不同的CDR3多态性,为多克隆增生的高斯分布,2例淋巴瘤型白血病患者外周血T细胞TCRalpha链32个家族CDR3表达频率不一致,部分家族呈缺失状态,患者各家族PCR产物的溶解曲线谱型图上,多数家族为多克隆增生的高斯分布,但每个患者均出现数量不等的单克隆和寡克隆增生家族。结论:荧光定量PCR溶解曲线分析TCRalpha链CDR3谱系漂移技术方法稳定简便,能较好地监测正常人和临床样本外周血T细胞TCRalpha链CDR3谱系漂移(单/寡/多克隆增生)。

主 题 词：T淋巴细胞受体 互补决定区3 荧光定量PCR 溶解曲线 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100102[100102] 10[医学] 

核心收录：

馆 藏 号：203342920...