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狗牙根ISSR-PCR反应体系的优化

狗牙根ISSR-PCR反应体系的优化

作     者:黄春琼 刘国道 Huang Chunqiong;Liu Guodao

作者机构:中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所海南儋州571737 农业部热带种质资源利用开放重点实验室海南儋州571737 海南大学农学院海南儋州571737 

基  金:热带牧草种质资源保护项目 国家科技支撑计划(No.2008BADB3B08)项目 973项目(No.2007CB108903) 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所研究生基金项目(No.YJS-2008-B002)资助 

出 版 物:《热带作物学报》 (Chinese Journal of Tropical Crops)

年 卷 期:2009年第30卷第11期

页      码:1584-1588页

摘      要:利用正交设计试验,对影响ISSR-PCR的Mg2+、dNTPs、引物、TaqDNA聚合酶和模板DNA5个因素进行优化试验。结果表明:25μLISSR-PCR反应体系中各因素的最佳条件为Mg2+2.5mmol/L、dNTPs0.25mmol/L、引物0.2μmol/L、TaqDNA聚合酶1.0U,模板DNA40ng。通过对狗牙根ISSR-PCR最佳反应体系进行梯度退火试验,得到引物UBC881的最佳退火温度为50.5℃。该体系在24个狗牙根种质中获得较好的扩增结果,该优化体系为今后利用ISSR技术进行狗牙根属种质资源的遗传多样性分析奠定了技术基础。

主 题 词:狗牙根 ISSR-PCR 分子标记 正交设计 体系优化 

学科分类:090503[090503] 0909[0909] 0905[农学-林学类] 09[农学] 

核心收录:

D O I:10.3969/j.issn.1000-2561.2009.11.007

馆 藏 号:203348735...

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