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一个承载分子的设计与肽抗生素hPAB-β的高效表达

一个承载分子的设计与肽抗生素hPAB-β的高效表达

作     者:饶贤才 金晓琳 胡晓梅 朱军民 陈自瑾 胡福泉 

作者机构:第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程重点实验室重庆400038 

基  金:国家自然科学基金资助项目 ( 39980 0 37 30 171119) 全军"十五"科研基金重点资助项目 ( 0 1Z0 70 ) 重庆市攻关课题资助项目 ( 2 0 0 0 ) 

出 版 物:《第三军医大学学报》 (Journal of Third Military Medical University)

年 卷 期:2002年第24卷第4期

页      码:389-392页

摘      要:目的 通过设计一个承载蛋白分子高效表达肽抗生素hPAB β ,为大量制备hPAB β奠定基础。 方法 根据肽抗生素的特性 ,确立 4条设计原则 ,并据此设计一 489bp的承载蛋白编码序列 ,用化学合成法获得该序列并将之克隆到pQE 3 2中构建成表达载体 ,进一步将肽抗生素hPAB β基因插入上述表达载体 ,肽抗生素基因位于承载蛋白编码序列 3’ 端 ,两者构成融合基因。将含融合基因的表达载体转化大肠杆菌JM10 9,筛选阳性重组子 ,并用阳性重组子表达融合蛋白。结果 设计的承载蛋白为 163个氨基酸 ,分子量 17668.80 ,等电点 5 .62 1。用承载分子与肽抗生素hPAB β构建的融合蛋白表达载体转化细菌后 ,筛选到 4个阳性重组子 ,均能高效表达肽抗生素融合蛋白 ,融合蛋白的产量占细菌总蛋白的 40 %~ 45 %。结论 设计的承载蛋白分子能够实现肽抗生素的高效表达。

主 题 词:承载蛋白 肽抗生素 高效表达 hPAB-β 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 1007[医学-药学类] 100705[100705] 07[理学] 071007[071007] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.3321/j.issn:1000-5404.2002.04.005

馆 藏 号:203350879...

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