应用肽核酸反向杂交技术检测HBV阿德福韦耐药突变株

作     者：单雪峰 谢素兰 黄爱龙 胡源 Shan Xuefeng;Xie Sulan;Huang Ailong;Hu Yuan

作者机构：重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆400016 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(编号:81101310) 教育部博士点新教师基金资助项目(编号:20115503120001) 重庆市教委转化成果资助项目(编号:Kjzh11201) 

出 版 物：《重庆医科大学学报》 (Journal of Chongqing Medical University)

年 卷 期：2014年第39卷第7期

页      码：943-946页

摘      要：目的:建立一种肽核酸(peptide nucleic acid,PNA)反向杂交技术,用于检测乙肝病毒阿德福韦酯(adefovir dipivoxil,ADV)常见耐药突变位点。方法:利用反向杂交技术,设计出特异性的PNA探针,与PCR扩增后带有生物素标记的样本进行杂交;通过对探针浓度,杂交温度和时间等条件的优化建立起最佳反应条件。应用该技术检测了临床ADV治疗慢性乙肝患者的72例血清样本,与测序法比较了其检测的准确性。结果:(1)通过共价结合能够将PNA探针固定在尼龙膜上,特异性检测ADV常见耐药突变位点。(2)与直接测序法相比,PNA反向杂交技术检测准确性为97.88%。结论:通过优化杂交反应,建立起快速、灵敏的检测乙肝病毒ADV常见耐药突变位点的PNA反向杂交技术。

主 题 词：肽核酸 反向杂交 乙型肝炎病毒 阿德福韦酯 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100104[100104] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.13406/j.cnki.cyxb.000181

馆 藏 号：203350962...