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三螺旋结构寡核苷酸序列对DHBV基因的连接及封锁抑制作用研究

三螺旋结构寡核苷酸序列对DHBV基因的连接及封锁抑制作用研究

作     者:熊鸿燕 陈惠孙 

作者机构:第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所第二研究室重庆400042 

基  金:国家自然科学基金资助项目!(39870 693) 全军"九五"医学科研规划项目!(98M0 96) 

出 版 物:《第三军医大学学报》 (Journal of Third Military Medical University)

年 卷 期:2000年第22卷第9期

页      码:819-822页

摘      要:目的 筛选与鸭乙肝病毒 (DHBV) DNAX C区目标基因特异连接的三螺旋结构寡核苷酸(TFO) ,探讨TFO对DHBV DNA的特异连接及抑制作用。方法 将人工合成的TFO与目标基因片断和含(DHBV)DNA的重组细胞反应 ,用电泳转移印迹、PCR和鸭肝原代细胞培养等技术观察TFO对相应基因的连接以及对细胞内DHBV DNA复制的抑制效应。结果 在所设计的多条TFO中 ,( 3 )TFO和 ( 5 )TFO在 3~ 4h内能与细胞内外目标基因双链直接连接 ,导致DHBV DNA复制一定程度的抑制 ;在DHBV DNA阳性的原代鸭肝细胞培养液中连续加入终浓度为 4μmol L的TFO ,大多数细胞组的培养液中DHBV DNA的检测在 10~12d开始呈现阴性。结论 TFO能直接与病毒的DNA连接 ,导致目标基因的复制抑制 ,有着潜在的特异抗病毒价值。

主 题 词:三螺旋结构寡核苷酸 鸭乙肝病毒 DHBV-DNA TFO 

学科分类:1004[医学-公共卫生预防医学类] 100401[100401] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.3321/j.issn:1000-5404.2000.09.002

馆 藏 号:203355718...

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