彗星分析法研究靶向SMPD1的siRNA对小鼠卵母细胞凋亡的保护作用

作     者：张仁礼 孟锦绣 闻安民 黄跃深 周灿权 王凯 贾磊 刘彩霞 邓新燕 陈系古 ZHANG Ren-li;MENG Jin-xiu;WEN An-ming;HUANG Yue-shen;ZHOU Can-quan;WANG Kai;JIA Lei;LIU Cai-xia;DENG Xin-yan;CHEN Xi-gu

作者机构：广东省医学科学院/广东省人民医院生殖医学中心广东广州510080 广东省医学科学院/广东省人民医院医学研究中心广东广州510080 广东省医学科学院/广东省人民医院皮肤科广东广州510080 中山大学附属第一医院生殖医学中心广东广州510080 中山大学实验动物中心广东广州510080 

基　　金：国家自然科学基金(30400474 30700327) 广东省自然科学基金(4009374 9151009101000011 7300047) 广东省医学科研基金(B2004038 B2006003) 广东省人口计生委科研项目(2009227) 

出 版 物：《南方医科大学学报》 (Journal of Southern Medical University)

年 卷 期：2009年第29卷第11期

页      码：2165-2167,2170页

摘      要：目的建立彗星分析小鼠卵母细胞凋亡的模型,研究靶向酸性鞘磷酯酶1(SMPD1)的siRNA对卵子自发性凋亡的保护作用,为建立新的生殖保护方法奠定基础。方法通过同源性分析并结合siRNA设计软件设计并化学合成靶向SMPD1的3条siRNA,用超排卵技术对雌性BALB/c小鼠进行超排卵并杀鼠取卵,利用显微注射的方法将siRNA分别导入超排获得的小鼠卵子,分别于48h和72h观察卵子形态学变化,通过彗星分析检测卵细胞DNA破坏程度来分析卵子自发性凋亡情况。结果彗星分析法观察到小鼠卵母细胞在体外培养24h可见少量DNA泳出,48h可见大量DNA泳出;通过显微注射导入siRNA48h后的彗星分析结果显示,其中1对siRNA注射组,即siRNA003组的卵母细胞泳出量与其它2个siRNA注射组及对照组相比显著降低(P<0.01),其它2对siRNA注射组与对照组无明显差异。结论靶向SMPD1的siRNA能够有效保护卵子的自发性凋亡,有望成为新的生殖保护方法。

主 题 词：酸性鞘磷脂酶1 卵母细胞 细胞凋亡 RNA干扰 彗星分析法 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:1673-4254.2009.11.005

馆 藏 号：203355745...