猪Ghrelin基因真核表达载体构建(英文)

作     者：曹月胜 陈俏俏 孙金海 

作者机构：青岛农业大学动物科技学院山东青岛266109 莱阳市畜牧局山东莱阳265200 

基　　金：Supported by Special Funds for Cultivation and Breeding of New Transgenic Organisms (2011ZX08006-003, 2009ZX08010-006B) Shandong Modern Agricultural Technology Innovation Program the National Natural Science Foundation of China (No.30871778) Taishan Scholar Project of Shandong in China~~ 

出 版 物：《Agricultural Science & Technology》 (农业科学与技术（英文版）)

年 卷 期：2012年第13卷第6期

页      码：1184-1185,1197页

摘      要：[目的]为研究转生长相关基因对猪的作用。[方法]采用RT-PCR方法,从13/17罗伯逊易位杂合子猪小肠组织中提取总RNA,将其纯化后作为PCR扩增模板,参考GenBank公布的猪Ghrelin的mRNA序列设计合成具有Nhe I和Hind III双酶切位点引物,扩增获得Ghrelin基因cD-NA全长序列。将准确的Ghrelin基因片段克隆于 pMD19-T simple Vector后进行序列分析,获得猪Ghrelin基因cDNA全长基因片段。经Nhe I和Hind III双酶切,将 Ghrelin基因cDNA片段连接到真核表达载体pEGFP-N1,获得真核表达载体的重组质粒pEGFP-Ghrelin。重组质粒转染猪成纤维细胞,观察标记基因荧光蛋白的表达。[结果]13/17罗伯逊易位杂合子猪的Ghrelin基因与已发表的序列相同,并成功获得具备猪Ghrelin基因全长cDNA序列的真核表达载体pEGFP-Ghrelin。[结论]构建的真核表达载体可以用于转基因猪的进一步试验,同时也为研究Ghrelin的调节机制奠定基础。

主 题 词：Ghrelin基因 真核表达载体 转基因 

学科分类：0905[农学-林学类] 09[农学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1009-4229-B.2012.06.008

馆 藏 号：203356212...