肺癌中EGFR外显子突变丰度的荧光偏振检测

作     者：杨阳 姜英浩 陈亚楠 强少盈 郑智坤 张菊 刘文超 Yang Yang;Jiang Yinghao;Chen Yanan;Qiang Shaoying;Zheng Zhikun;Zhang Ju;Liu Wenchao

作者机构：第四军医大学西京医院肿瘤科陕西西安710032 第四军医大学药学系基因诊断技术研究所陕西西安710032 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(编号:81371891) 

出 版 物：《现代肿瘤医学》 (Journal of Modern Oncology)

年 卷 期：2015年第23卷第13期

页      码：1786-1790页

摘      要：目的:建立一种基于荧光偏振技术快速、特异的检测体系,并将该体系用于检测肺癌标本中EGFR基因19、21外显子的突变丰度,以便更加全面、准确地预测靶向药物疗效以及指导临床靶向药物选择。方法:应用Primer premier 5.0软件在EGFR基因19、21号外显子突变区域上下游处设计19、21外显子各自的通用PCR引物,并设计覆盖各自突变区域的两对荧光标记探针(突变型和野生型)。以包含野生型(19、21)和突变型(19、21)的质粒分别为4种阳性标准品,空载体为阴性标准品,分别作为模板进行PCR扩增反应,将扩增结果应用荧光偏振仪进行检测,以建立突变丰度测量体系。最后,对51例肺腺癌标本进行检测,并计算出各自的突变丰度。结果:荧光偏振检测EGFR基因19、21外显子突变结果与直接测序法结果无统计学差异,且最低检测浓度为40拷贝/μl,最低检测含量可达10%。本法可提供更全面的瘤内基因变异丰度分析,有利于指导临床用药。结论:荧光偏振检测EGFR基因19、21外显子突变结果不仅灵敏度与特异性高,还能提供全面的瘤内异质性分析指标,可为临床肺癌个体化治疗效果提供预测依据。

主 题 词：荧光偏振检测 肺癌 表皮生长因子受体 突变丰度 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1672-4992.2015.13.02

馆 藏 号：203357374...