山羊痘病毒糖蛋白基因ORF122的克隆及其原核表达

作     者：李春艳 郑敏 黎宗强 莫胜兰 屈素洁 梁媛 李向涛 秦保亮 

作者机构：广西大学动物科学技术学院广西南宁530005 广西动物疫病预防控制中心广西南宁530001 河南新乡市动物疫病预防控制中心河南新乡453003 

基　　金：广西青年科学基金项目(桂科青0991042) 广西科技创新能力与条件建设项目(08-05-01D) 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2010年第40卷第8期

页      码：807-810页

摘      要：以山羊痘弱毒疫苗毒株AV41的细胞培养物中提取的总DNA为模板,通过PCR扩增获得山羊痘病毒(GTPV)ORF122基因片段。另设计1对引物,经PCR扩增获得缺失跨膜功能区的ORF122基因片段,将其克隆入原核表达载体pET-32a中,构建了重组表达质粒pET-ORF122,将其转化大肠杆菌BL21感受态细胞,经IPTG诱导,成功表达出分子质量为32ku的融合蛋白。免疫印迹试验证实,表达的融合蛋白可以被GTPV阳性血清识别。经对该重组蛋白进行纯化,结果其纯度达到90%以上,产量达5.5mg/L。上述结果为GTPV重组诊断抗原的筛选和新型疫苗的研制奠定了基础。

主 题 词：山羊痘病毒 ORF122基因 克隆 原核表达 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.16656/j.issn.1673-4696.2010.08.007

馆 藏 号：203358215...