牛筋草ISSR-PCR反应体系的建立与优化

作     者：张杨 张朝贤 王金信 魏守辉 黄红娟 Zhang Yang;Zhang Chaoxian;Wang Jinxin;Wei Shouhui;Huang Hongjuan

作者机构：山东农业大学植物保护学院泰安271018 中国农业科学院植物保护研究所中国农业科学院杂草鼠害生物学与治理重点开放实验室北京100193 

基　　金：转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08012-025B) 

出 版 物：《植物保护》 (Plant Protection)

年 卷 期：2012年第38卷第3期

页      码：90-94页

摘      要：以牛筋草地上组织为材料,采用正交优化和单因子试验两种方法对影响牛筋草ISSR-PCR体系的Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq DNA聚合酶浓度、引物浓度和DNA模板浓度5个因素进行优化试验,建立适合牛筋草ISSR-PCR的反应体系。结果表明,牛筋草ISSR-PCR反应体系的最佳条件为:Mg2+1.75mmol/L,dNTP 0.4mmol/L,Taq DNA聚合酶1U/25μL,引物0.3μmol/L,模板DNA 80ng/25μL,10×PCR Buffer 2.5μL/25μL。利用优化体系进行牛筋草的ISSR-PCR反应,可获得稳定性高、重复性好、背景清晰的电泳结果。

主 题 词：牛筋草 ISSR-PCR 正交设计 单因子试验 

学科分类：09[农学] 0904[农学-动物医学类] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.0529-1542.2012.03.020

馆 藏 号：203358402...