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禽腺病毒QU株一个复制非必需区的鉴定

禽腺病毒QU株一个复制非必需区的鉴定

作     者:孙锦 李秋艳 李云龙 黄兵 宋敏训 李新华 Jin Sun;Qiuyan Li;Yunlong Li;Bing Huang;Minxun Song;Xinhua Li

作者机构:山东师范大学生命科学学院动物抗性省级重点实验室济南250014 青岛农业大学青岛266109 山东省农业科学院家禽研究所济南250023 

基  金:山东省优秀中青年科学家科研奖励基金资助(No.2006BS06006) 山东省农业科学院博士基金资助(No.2006YBS018)~~ 

出 版 物:《生物工程学报》 (Chinese Journal of Biotechnology)

年 卷 期:2008年第24卷第7期

页      码:1263-1267页

摘      要:禽腺病毒QU弱毒株属于鸭腺病毒1型病毒,可作为潜在的重组疫苗载体。为确定QU株的复制非必需区,参照鸭腺病毒1型病毒基因组右侧E4区附近序列设计引物,扩增QU株基因组的一段3.4kb片段,插入来自pEGFP-C1质粒的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因表达盒片段,构建了含EGFP基因的重组质粒pADGFP。采用脂质体介导法,将重组质粒pADGFP与QU株共转染CEF细胞,用96孔板稀释法筛选纯化表达绿色荧光蛋白的重组QU病毒株rQUGFP。该重组毒的生长曲线与亲本毒一致,连续传代后病毒滴度稳定。结果表明,QU株基因组右侧E4区附近一段包括ORF1、ORF8和ORF9三个开放阅读框的区域为病毒的复制非必需区,且插入的EGFP基因可以稳定表达。为进一步以禽腺病毒QU株为载体构建重组疫苗的研究打下基础。

主 题 词:禽腺病毒 鸭腺病毒Ⅰ型 复制非必需区 增强型绿色荧光蛋白 重组病毒 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 0831[工学-公安技术类] 090601[090601] 1001[医学-基础医学] 09[农学] 0906[农学-水产类] 0836[0836] 

核心收录:

D O I:10.3321/j.issn:1000-3061.2008.07.024

馆 藏 号:203363456...

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