猪胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌和副猪嗜血杆菌复合PCR检测方法的建立

作     者：朱吕昌 陈义平 李明义 郭玉广 马爽 周洁 Zhu Lu-chang;Chen Yi-ping;Li Ming-yi;Guo Yu-guang;Ma Shuang;Zhou Jie

作者机构：中国动物卫生与流行病学中心山东青岛266032 扬州大学兽医学院江苏扬州225009 青岛易邦生物工程有限公司山东青岛266000 

基　　金：十一五国家科技支撑计划项目(2006BAD06A12) 

出 版 物：《中国动物检疫》 (China Animal Health Inspection)

年 卷 期：2008年第25卷第11期

页      码：22-25页

摘      要：目的建立可以同时检测猪胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌和副猪嗜血杆菌的快速而可靠的PCR检测方法。方法和结果根据胸膜肺炎放线杆菌的Apx-VIA基因序列、多杀性巴氏杆菌和副猪嗜血杆菌的16SrRNA基因序列设计5条引物。猪胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌和副猪嗜血杆菌模板的PCR扩增产物大小分别为342bp,485bp和1258bp。复合PCR对1～12型猪胸膜肺炎放线杆菌标准株,6株多杀性巴氏杆菌标准株,1～15型副猪嗜血杆菌以及25株经生化鉴定确认为上述三种细菌的分离株的基因组DNA作为模板进行检测,均获得预期大小的扩增产物。以猪放线杆菌、吲哚放线杆菌等14种常见细菌作为阴性对照进行PCR检测,结果仅有支气管败血波氏杆菌产生了可以和上述三个特异性条带明显区分的PCR产物。复合PCR针对胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌和副猪嗜血杆菌的敏感性分别为14pg、34pg和37pg。结论本研究建立的复合PCR特异性好,敏感性高,可以用于猪胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌和副猪嗜血杆菌的快速检测。

主 题 词：猪胸膜肺炎放线杆菌 多杀性巴氏杆菌 副猪嗜血杆菌 复合PCR 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1005-944X.2008.11.011

馆 藏 号：203363549...