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反义硫代修饰寡核苷酸体外抗甲型流感病毒感染的效应研究

反义硫代修饰寡核苷酸体外抗甲型流感病毒感染的效应研究

作     者:邵晓珊 解元元 杨锡强 赵晓东 赵耀 刘玮 王莉佳 SHAO Xiao-shan;XIE Yuan-yuan;YANG Xi-qiang;ZHAO Xiao-dong;ZHAO Yao;LIU Wei;WANG Li-jia

作者机构:重庆医科大学附属儿童医院儿科研究所400014 

基  金:国家自然科学基金项目(C03011403) 

出 版 物:《中华微生物学和免疫学杂志》 (Chinese Journal of Microbiology and Immunology)

年 卷 期:2009年第29卷第2期

页      码:130-136页

摘      要:目的在感染甲型流感病毒(influenza Avirus,IFAV)的人气道上皮细胞(9HTEO)中观察与IFAV PB1、M2、NS、PB2、HA基因互补的反义硫代修饰寡核苷酸(ASODN)的抗病毒活性。方法细胞外体系观察设计的ASODN效率,筛选对IFAV有效的3个ASODN进行9HTEO的抗病毒效应。倒置显微镜下观察IFAV的致细胞病变作用和ASODN的细胞保护作用。MTT方法测细胞存活率,空斑试验、***、Westernblot、免疫荧光检测ASODN特异性抗病毒效应,MTF法检测ASODN对细胞的保护作用。结果IFAV感染复数(MO!)在0.1以上时,培养5d后IFAV感染的9HTEO细胞全部死亡。设计的ASODN能够提高感染细胞的存活率,且呈量效依赖关系。空斑试验、***、Westernblot、免疫荧光试验证实在细胞水平、基因转录水平、蛋白水平针对IFAV PB1、M2、NS基因mRNA转录起始点保守序列设计的ASODN具有特异性抗IFAV作用。结论ASODN具有较明显的抗病毒活性,为进一步研究和开发新型抗IFAV药物提供了实验依据。为高致病性禽流感(H5N1)的基因治疗提供了新的思路和理论依据。

主 题 词:甲型流感病毒 反义寡核苷酸 人气道上皮细胞 病毒复制 

学科分类:1004[医学-公共卫生预防医学类] 100401[100401] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2009.02.009

馆 藏 号:203363663...

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