高致病性禽流感通用和H5亚型荧光定量PCR方法的建立

作     者：黄平 胡守旺 王秋泉 杨杏芬 高秀洁 李杰 

作者机构：广东省疾病预防控制中心应急病原学检测重点实验室广东广州510300 中山大学达安基因股份有限公司广东广州510665 

基　　金：广东省科技项目(2004A2090102) 

出 版 物：《第四军医大学学报》 (Journal of the Fourth Military Medical University)

年 卷 期：2009年第30卷第23期

页      码：2869-2872页

摘      要：目的:建立高致病性禽流感H5亚型荧光定量PCR方法.方法:根据禽流感病毒(AIV)M基因和H5-HA基因分别设计AIV通用和H5亚型特异荧光定量PCR引物和探针,优化反应体系和反应条件,分析该试剂的敏感性、特异性、重复性等.结果:经优化反应体系和反应条件后,AIV通用试剂和AIV-H5试剂的敏感性达到1×101.25EID50水平;与细胞培养比较,AIV-H5试剂Kappa吻合系数κ为0.991(P<0.01),统计学显示两种检测结果的吻合度很强;批内和批间精密度CT值的CV值均远小于10%,可重复性良好.结论:本项目研制的AIV通用试剂和AIV-H5试剂的敏感性、特异性、重复性均好,适合在禽流感疫情和疑似H5禽流感病例中检测使用.

主 题 词：实时荧光定量PCR 荧光定量PCR 禽流感 H5亚型 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 1010[医学-医学技术类] 100103[100103] 10[医学] 

馆 藏 号：203364111...