利用双抗生素标记提高血管钠肽在毕赤酵母中的分泌表达

作     者：房聪 李鹏 丁月娣 雷楗勇 陈蕴 金坚 FANG Cong;LI Peng;DING Yue-di;LEI Jian-yong;CHEN Yun;JIN Jian

作者机构：江南大学医药学院药物设计与分子药理研究室无锡214122 

基　　金：国家重大新药创制专项资金资助项目(2009ZX09103) 

出 版 物：《中国生物工程杂志》 (China Biotechnology)

年 卷 期：2011年第31卷第4期

页      码：1-6页

摘      要：依照血管钠肽氨基酸序列,根据毕赤酵母密码子偏爱性,人工合成了血管钠肽的编码基因,通过PCR技术,扩增出5 端含有组氨酸标签的血管钠肽基因片段,构建的分泌型表达质粒pPIC9K-VNP,pPICZαB-VNP分别经SalⅠ和SacⅠ线性化后,双质粒转化毕赤酵母GS115宿主菌后,G418/Zeocin双抗筛选出整合型His+Muts表达菌株,Tricine-SDS-PAGE和Western blot分析,证明His-VNP在毕赤酵母中可有效分泌表达,摇瓶产量可达70mg/L左右,双质粒整合较单质粒整合重组子目的多肽表达量提高了75%。生物学活性研究表明,表达产物在体外具有对巨噬细胞iNOS和TNFαmRNA的抑制作用。

主 题 词：血管钠肽 毕赤酵母 分泌表达 双抗标签 

学科分类：08[工学] 09[农学] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.13523/j.cb.20110401

馆 藏 号：203364679...