肝螺杆菌TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR快速检测方法的建立及应用研究

作     者：高正琴 邢进 冯育芳 岳秉飞 贺争鸣 GAO Zheng-qin;XING Jin;FENG Yu-fang;YUE Bing-fei;HE Zheng-ming

作者机构：中国食品药品检定研究院北京100050 

基　　金：中国食品药品检定研究院中青年研究发展基金(2010C5) 

出 版 物：《中华微生物学和免疫学杂志》 (Chinese Journal of Microbiology and Immunology)

年 卷 期：2011年第31卷第9期

页      码：833-838页

摘      要：目的建立特异、敏感、快速检测肝螺杆菌的TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR方法。方法针对肝螺杆菌flaB基因的保守区设计特异性引物和探针，建立肝螺杆菌Taq Man MGB探针实时荧光定量PCR方检测方法，验证方法的特异性、敏感性和稳定性。对2008-2011年期间采集的1081份临床样本中的肝螺杆菌进行检测，同时进行分离培养和常规PCR检测。结果建立的TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR方法对肝螺杆菌的检测具有高度的特异性，对幽门螺杆菌、空肠弯曲菌、泰泽氏菌、侵肺巴斯德氏菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌均无交叉反应，检测的灵敏度达8．3拷贝。标准曲线显示各浓度范围内具有良好的线性关系，相关系数为0．999，斜率为-3．227，TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR效率为100％。对1081份临床样本进行检测，TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR和常规PCR均能检出86份肝螺杆菌阳性样本，而细菌分离培养则仅检出4份阳性。结果显示，建立的TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR方法比细菌分离培养方法更敏感，能够直接从临床样本中检出肝螺杆菌DNA，检测时间仅为2h。结论研究建立的TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR方法具有可靠、特异、敏感的特点，适用于肝螺杆菌的快速检测。

主 题 词：肝螺杆菌 小沟结合物(MGB)探针 实时荧光定量PCR 检测 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 1010[医学-医学技术类] 100215[100215] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2011.09.020

馆 藏 号：203364863...