基于TaqMan探针三重荧光PCR检测MRSA

作     者：袁慕云 张旺 卓锦雪 谢力 陈碧玲 许龙岩 

作者机构：广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心广东广州510623 

基　　金：广东出入境检验检疫局科技计划项目(2012GDK35) 

出 版 物：《中国卫生检验杂志》 (Chinese Journal of Health Laboratory Technology)

年 卷 期：2014年第24卷第2期

页      码：239-241,252页

摘      要：目的建立基于TaqMan探针三重荧光PCR检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)方法。方法根据nuc(GenBank:EF529607.1)、mecA(GenBank:JN108029.1)和femA gene(GenBank:DQ352463.1)基因序列,分别设计特异性引物和Taqman探针,nuc探针5、端标记TET、mecA探针5、端标记HEX、femA探针5、端标记FAM,建立基于Taqman探针三重荧光PCR检测MRSA的方法,并对69株金黄色葡萄球菌分离株进行基因检测与耐药表型比较。结果 MRSA出现femA、mecA、nuc基因扩增曲线,而表皮葡萄球菌等14株对照菌株扩增结果呈阴性;femA、mecA、nuc基因的扩增效率分别为104%、90.3%、98%,线性系数R2分别为0.999、0.994、0.998;69株分离株中femA、nuc基因阳性率为100%,mecA基因阳性率为13.04%,mecA与耐甲氧西林表型符合率为100%。结论建立的方法特异性强、准确,为金黄色葡萄球菌鉴定和耐药基因分析提供参考依据。

主 题 词：MRSA Taqman探针 三重荧光PCR 耐药基因 检测 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

馆 藏 号：203365982...