猪圆环病毒2型SYBR GreenⅠ荧光定量PCR诊断方法的建立

作     者：余波 周思旋 谭诗文 徐景峨 史开志 杨莉 YU Bo;ZHOU Si-xuan;TAN Shi-wen;XU Jing-e;SHI Kai-zhi;YANG Li

作者机构：贵州省畜牧兽医研究所贵阳550005 

基　　金：贵州省科技厅农业攻关项目(黔科合NY字3085) 贵州省畜禽健康养殖技术创新能力建设项目(黔科合院所创能4004) 

出 版 物：《湖北农业科学》 (Hubei Agricultural Sciences)

年 卷 期：2014年第53卷第22期

页      码：5474-5477,5525页

摘      要：根据Gen Bank中猪圆环病毒2型ORF2基因序列设计特异性引物,PCR扩增获得猪圆环病毒2型ORF2基因片段,并克隆到p MD-18T载体上作为阳性标准品。通过对SYBR Green I荧光定量PCR反应条件的优化,建立了猪圆环病毒2型的SYBR Green I荧光定量PCR诊断方法。扩增产物的溶解曲线分析只出现1个单特异峰,无引物二聚体,对PRV、PPV、***、CSFV、PRRSV均无阳性信号,可重复性好,测灵敏度可达4.0×101拷贝/μL。结果表明,建立的猪圆环病毒2型SYBR Green I实时荧光定量PCR具有特异、灵敏、快速、重复性好,适合于猪圆环病毒2型临床样品的检测。

主 题 词：猪圆环病毒2型 ORF2基因 SYBR Green I荧光定量PCR 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2014.22.037

馆 藏 号：203366557...